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豬尿中14種β-受體激動劑殘留的測定

來源：SCIEX

此方法所需樣品由阿爾塔科技提供：

注：可以按照客戶需求，定制特定品種、特定濃度、特定溶劑的混標。

將瘦肉精添加于飼料中，可以增加動物的瘦肉量、減少飼料使用、使肉品提早上市、降低成本。但因為考慮對人體會產生副作用，各國開放使用的標準不一。瘦肉精是一類藥物，而不是一種特定的物質，是指能夠促進瘦肉生長的飼料添加劑。任何能夠促進瘦肉生長、抑制肥肉生長的物質都可以叫做“瘦肉精”。目前，能夠實現這種功能的物質是一類叫做β-受體激動劑的藥物，比如在中國造成中毒的克侖特羅（clenbuterol）和美國允許使用的萊克多巴胺/又譯雷托巴胺（Ractopamine）。

瘦肉精在上海曾經引發了幾百人的中毒事件。而在臺灣，由于從美國進口的豬肉里含有健康的肉瘦肉精，幾乎挑起一場政治爭端。由于西方國家一般不消費動物內臟（豬肉一般不含瘦肉精，但內臟特別是肝臟則會殘留瘦肉精），因而在美國、加拿大、新西蘭等國，瘦肉精這類物質的使用是合法的。.

引言

β-受體激動劑主要用于治療人、畜支氣管哮喘和支氣管痙攣。在用于畜牧飼喂時被非法用于促進動物生長，減少脂肪沉積，提高瘦肉率的作用。人類長期食用含β-受體激動劑殘留的食物可能會引起中毒，并對健康造成極大的傷害。目前，我國禁止在使用動物的飼養中使用。由農業部發布的國家標準《豬尿中β-受體激動劑多殘留檢測液相色譜-串聯質譜法（農業部1025號公告-11-2008）》和農業行業標準《動物尿液中11中β-受體激動劑的檢測（農業部1063號公告-3-2008）》，對動物尿液中β-受體激動劑液相色譜-質譜/質譜測定方法進行了規定。

本實驗依據農業部1025號公告-11-2008和農業部1063號公告-3-2008中的前處理方法，使用液相色譜質譜外標法定量，并進行簡單的可行性驗證。

樣品前處理

準確量取5 mL尿樣與50 mL離心管內，加入0.5 mL2 mol/L的乙酸銨緩沖液(pH=5.2），加入40 μL葡萄糖醛苷酶和芳基硫酸酯酶，漩渦混勻，37℃避光水浴震蕩16 h。10000 rpm離心10 min，取上清液與另一50 mL離心管內，用5 mol/LNaOH 調節pH值9.8，加入10 mL異丙醇-乙酸乙酯，加入約2 g固體氯化鈉，漩渦震蕩10 min，5000 rpm離心10 min。以10 mL異丙醇-乙酸乙酯再次提取，合并兩次上清液，50℃旋轉蒸干，以5 mL 2mol/L乙酸銨溶液溶解，備用。

取備用液過MCX柱以5 mL 5%氨水甲醇溶液洗脫。洗脫液在50℃下氮氣吹干。用1 mL0.2%甲酸水溶液溶解，待測，過0.22 μm濾膜過濾，待測。

液相色譜條件

流動相

A：含5 mM甲酸銨和0.1%甲酸水溶液

B：乙腈

色譜柱

Phenomenex KinetexC18 4.6×100mm 2.6 μm 或相當

柱溫

40℃

梯度時間表

質譜條件

TripleQuad? 6500

新型的IonDrive?專利技術貫穿多組件，以及新設計的高能檢測器HED+，提供超寬的定量線性動態范圍，無可比擬的定量分析靈敏度，無與倫比的數據準確性和重現性。可與離子淌度差分技術SelexION?匹配，提高選擇性。

離子源：具備電噴霧接口的Turbo V?離子源

極性：正離子模式，離子源相關參數如下：

CUR:35.00

TEM:700.00

GS1:60.00

GS2:55.00

IS:5500.00

化合物離子對信息

總結

本方法基于國家標準《豬尿中β-受體激動劑多殘留檢測液相色譜-串聯質譜法（農業部1025號公告-11-2008）》和農業行業標準《動物尿液中11中β-受體激動劑的檢測（農業部1063號公告-3-2008）》，使用LC-MS/MS法測定動物源食品中多種β-受體激動劑殘留的測定。經驗證，適用于SCIEX Triple Quad? 3500, 3200, 4000系列， 4500系列、API 5000、5500系列以及6500系列的LC-MS/MS系統。方法靈敏度高，重現性好，適用于日常分析。

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